六通阀的清洗

  1、六通阀的清洗 在INJECT位置，把针孔清洗器（Needle Port Cleaner，Part No.7125－054）套在1ml注射器上，注射器事先吸取1mL流动相，慢推即可清洗六通阀，随后推一针空气，把孔道里面的液体吹尽。  实际上，找个操作是清洗导针孔道，就是六通阀里有孔的塑料管。每次进样时，进样针残留的样品溶液会粘附在这个塑料管上，会污染下一次进样，一般几十针进样后需清洗一次。更换分析样品时须先清洗。   对于楼主顶层的问题，如果你清洗后没有把导针孔道的液体吹干的话，液体就会进入HPLC系统中，不过，一般清洗液都是选择流动相，故不会有太大的危害。先吹干再进样。 定量环一般不用清洗，因为每次进样时流动相已经在冲洗了。   2、满环进样与非满环进样    满环进样是以超过定量环体积的量进样，如20uL定量环满环进样可用大于20uL的液体进样，而实际进入HPLC系统的体积就是定量环的体积（一般用2－5倍定量环体积进样，6－10倍进样准确性更佳）。   非满环进样是以小于定量环体积的量进样，一般不超过定量环体积的一半（层流效应，流体中心流速大于管壁流体的流速）。20uL定量环采用非满环进样应小于10uL。进样体积从进样器上读出。样品较少时可以用非满环进样方式进样。    3、关于进样量  进样量是进入HPLC系统的样品的质量或物质的量。满环进样时常以浓度表示（体积一定），进样浓度一样时可以进样体积表示（浓度一定）。统一换算成质量或物质的量。   从以往的帖子看，楼主在做多糖的SEC，生物高分子的溶液粘度大，不可能配制很高浓度的溶液，一般以稀溶液进行分析。此时，进样体积的多少对分析的结果会存在一定影响（如峰扩展和柱过载）。鉴于此，应对进样的体积进行试验，选择对结果影响较小的体积（范围）进样。    对一般HPLC的定量分析而言，较少研究进样体积的影响（此时，进样量远小于柱的zui大容量），而制备色谱中此问题则需要考虑。